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極威生物SNU-182人肝癌細胞介紹

發布時間：2023/4/7 13:52:35 閱讀次數：92

一、細胞基本屬性
細胞貨號：JW-441
細胞種屬：人
生長情況：貼壁
培養條件：1640+10%FBS+1% P/S
培養環境：air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細胞培養操作
換液周期：2-3天
培養基體積：T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
傳代比例：1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定）
傳代方法：
1. 盡量吸干凈T25瓶原培養基；
2. 加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s，吸走潤洗的PBS；
3. T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動培養瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層；
4. 將培養瓶放入37度培養箱消化；
5. 消化到細胞間隙變大，但未完全脫落時加2-3ml完全培養基終止胰酶消化；
6. 混勻細胞，900rpm離心3-5min，棄上清；
7. 加新的完全培養基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養瓶里；
8. 補足完全培養基，將培養瓶放回培養箱靜置培養；
注意事項：不同品牌胰酶消化時間差別較大，注意嚴格控制消化時間
消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔，不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態。
三、細胞凍存操作

凍存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%完全培養基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規格：200-300萬/ml，1ml每管
凍存方法：
1. 消化并離心獲得細胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞；
2. 將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存管；
3. 將凍存管轉入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉入-80度過夜，第二天轉入液氮保存
注意事項：
凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查凍存活性，若有異常，及時調整實驗方案